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如何配胰蛋白酶溶液
点击次数:43 发布时间:2019-11-04

    在细胞培养中我们会经常用到胰蛋白酶溶液。在试验中胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。上海恒远技shu支持部分特别整理这篇文章,告诉你如何配胰蛋白酶溶液。

    胰蛋白酶溶液的配制:

    (1)称取胰蛋白酶粉末置烧杯中,先用少许D-Hanks平衡盐溶液(pH7.2左右)调成糊状,然后再补足D-Hanks平衡盐溶液,搅拌混匀,置室温4小时或冰箱过夜,并不断搅拌振荡;

    (2)次日,先用滤纸粗滤,再进行过滤除菌,分装入瓶中,低温冰箱保存备用,常用浓度为0.25%或0.125%。胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可调用碳酸氢钠溶液调pH至7.2左右。

    保存条件:配制好的胰蛋白酶溶液必须保存在-20℃冰箱中,以免分解失效。

    EDTA?4Na溶液

    EDTA是一种化学螯合剂,对细胞有一定的离觧作用,而且毒性小,价格低廉,使用方便。常用工作液浓度为0.02%。通常与0.25%的胰蛋白酶溶液按1:1混合使用(混合液)。注意:使用EDTA处理细胞后,一定要用Hanks液冲洗干净,因残留的EDTA会影响细胞生长。

    EDTA溶液配制:用无钙、镁的D-HBSS平衡盐溶液溶解后,高压蒸汽灭菌,分装成小瓶,室温或4℃冰箱保存。

    胰蛋白酶–EDTA?4Na溶液(0.05%胰蛋白酶,0.53mMEDTA?4Na)

    0.5g胰蛋白酶+0.2gEDTA?4Na+1LD-HBSS。-20℃冰箱中保存。

    上海恒远的胰蛋白酶-EDTA消化液经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。索莱宝特别提醒为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

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